Что такое кровь на рпга

Оглавление

Время суток при взятии проб крови на исследование – рекомендации

Анализ РПГА назначается больному в случае возникновения подозрений на развитие в его организме любых стадий сифилиса. Кроме этого данный анализ необходим перед планированием беременности отдельным категориям женщин. Именно на ранних сроках выявление данного заболевания позволит назначить соответствующее лечение и планировать беременность, с целью рождения здорового малыша.

Сдача крови на определение в организме сифилиса назначается и при подготовке пациента к назначенной операции. Именно в этом случае возможен удачный исход оперативного вмешательства в организм. Также подтверждение наличия в организме возбудителей сифилиса позволит врачам планировать ход предстоящей операции таким образом, чтобы ожидаемый лечебный эффект был максимальным.

Благодаря РПГА в данном случае удается предотвратить сотни случаев заражения реципиентов кровью больных сифилисом. В тоже время, известно много случаев, когда люди приходят в пункты сдачи крови в качестве доноров, а сдав ее на РПГА узнают, что больны сифилисом.

Сифилис — это тяжелое венерическое заболевание, которое на начальном этапе протекает бессимптомно. Спустя некоторое время, на коже или слизистой оболочке появляется твердое образование — шанкр.

Чаще всего узелок поражает половые органы, но у некоторых он появляется на слизистой рта или на кожных покровах любой части тела. В этом случае заподозрить сифилис достаточно сложно.

К примеру, шишечка в ротовой полости нередко принимается за стоматит. Для диагностики требуется анализ крови на РМП. Одним из преимуществ данного метода является возможность выявить сифилис на ранних стадиях.

Существует и третичный сифилис — это продолжительное течение заболевания, при котором антитела присутствуют, но на время исчезают. При этом человек может быть заражен сифилисом в течение долгих лет.

При третичном сифилисе вероятность достоверного результата имеет широкий диапазон значений — от 37% до 94%, в зависимости от того, присутствуют ли на момент анализа в крови антитела.

Для точности исследования необходимо многократное проведение анализа, чтобы с уверенностью говорить о наличии или отсутствии возбудителя заболевания.

Основное предназначение исследования — определить различные антитела, которые вырабатываются к одной из составляющих мембран — кардиолипину. Выработка этих антител обычно начинается на начальной стадии заболевания, примерно в течение недели или 10 дней после образования сыпи, узелков или других признаков сифилиса.

Процедура забора крови не отличается от любого анализа.

Биоматериал сдается в утреннее время натощак, а накануне следует лишь позаботиться о некоторых мерах предосторожности:

  1. Последний прием пищи — за 8 часов до анализа;
  2. За сутки отказаться от алкоголя, жирных жареных блюд и физических нагрузок;
  3. Утром перед сдачей крови разрешается выпить стакан негазированной воды;
  4. За 2-3 часа до анализа нельзя курить;
  5. 20-30 минут перед забором крови необходимо посидеть в спокойной обстановке.

Если пациент принимает какие-либо медикаменты или оральные контрацептивы, об этом нужно заранее предупредить врача. Также за несколько дней рекомендуется соблюдать спокойствие, не подвергать себя воздействию стрессоров и не нервничать.

1 Для сдачи анализа крови лучше всего подходит утреннее время суток, нормы всех анализов разработаны под временной интервал 7.00-11.00 часов утра.

РПГА в диагностике сифилиса введение

2 Сдавать кровь для анализов следует натощак – последний прием пищи перед забором материала должен быть не раньше, чем за 8-12 часов. Пить можно только воду, в обычном режиме.

  • биохимические исследования (кроме Тропонин I, гликированный гемоглобин, калий, натрий, хлор, кальций общий, кальций ионизированный, фосфор, магний, цинк, медь, железо, трансферрин, ферритин, ЛЖСС, ОЖСС),
  • некоторые гормональные тесты (Инсулин, С-пептид),
  • микрореакция на сифилис (RPR, РПГА),
  • иммунограмма,
  • фаготест,
  • генетические исследования (транслокации).

Для исследования всех остальных тестов, при невозможности выполнения рекомендуемых условий взятия крови утром, натощак, допускается взятие пробы в течение дня, через 2-3 часа после приема небольшого количества нежирной пищи.

Лучше будет, если родители в лабораторию возьмут с собой бутерброд, чтоб была возможность покушать сразу после выхода из процедурного кабинета.

Если анализ крови предстоит грудному ребенку, то после последнего кормления должно пройти хотя бы 2 часа.

3 Питание ребенка за 1-2 дня до анализа крови должно исключать сладости, жареную и жирную пищу. Если избежать употребления запрещенных продуктов не удалось, то рекомендуется предупредить об этом лечащего врача.

Что такое кровь на рпга

4 Если ребенку показан ежедневный прием лекарственных препаратов (в том числе и витаминов), то кровь для анализа нужно сдать до принятия лекарств. Также при приеме медикаментов необходимо учитывать их влияние на норму общего анализа крови ребенка, эта информация должна быть указана в инструкции к применению. Если возникли сомнения или вопросы, лучше проконсультироваться с лечащим врачом.

5 Постарайтесь исключить физические нагрузки у ребенка перед сдачей крови – бег, бассейн, езда на велосипеде, подъем по лестнице, долгие пешие прогулки.

Постарайтесь сделать процедуру сдачи крови максимально комфортной для ребенка, ведь стресс и даже плач может значительно изменить показатели. Ребенок должен быть спокоен перед сдачей анализа, для этого рекомендуется отдохнуть перед процедурой в течение 10-15 минут.

6 Даже самым маленьким детям до проведения процедуры следует объяснить серьезным тоном, что его ждет и для чего это нужно. Пусть малыш не до конца поймет суть ваших слов, но спокойный и утвердительный тон придаст ему спокойствие и снимет излишнюю тревожность.

7 Не сдавайте анализ крови после других исследований или процедур (рентген, УЗИ, физиоте­рапия, массаж).

8 Лаборатории отличаются по методикам проводимых исследований и единицам измерений. Для наиболее точной расшифровки и сравнения результатов лабораторных анализов в динамике, рекомендуется сдавать их в одной лаборатории и манипуляционном кабинете.

Грамотная подготовка при сдаче анализа крови предполагает получению точных результатов. Поэтому важно соблюдать выше описанные рекомендации, не забывая, что лабораторные исследования предоставляют лечащему врачу до 70% значимой информации для постановки диагноза.

Обозначения: « » рекомендуется; « /-» допускается с ограничениями, суточный ритм следует учитывать при исследованиях в динамике и пограничных значениях результатов относительно референсных пределов; «-» нежелательно

Название теста 8.00 — 11.00 12.00 — 17.00 18.00 — 8.00
Гормональные тесты /-
Маркеры костного обмена (остеопороза) /-
Биохимические тесты /- /- (экстренные)
Витамины /-
Иммунологические профили, интерфероновый статус
Онкомаркеры
Аутоиммунные маркеры
Аллергологические тесты
Общий анализ крови, коагулология /- (экстренные)
Инфекции
Общий анализ крови, коагулология /-
Генетические тесты
Микроэлементы /-
Гормональные исследования
АКТГ около 9 часов
Кортизол
Паратгормон после 9 часов /-
Кальцитонин /-
Альдостерон /-
Ренин /-
Катехоламины /-
Пролактин /-
Тиреоидная панель /-
Инсулин, С-пептид в зависимости от цели
ФСГ, ЛГ /-
Эстрадиол, прогестерон, тестостерон (жен) ГСПГ /-
17-ОН-прогестерон, андростендион /-
ДЭА-S /-
Бета-ХГЧ (тест на берем.)
Тестостерон, ингибин (муж). /-
PRISCA
Эритропоэтин /-
Остальные гормоны /-

Для того чтобы тест-система показала верные результаты, пациенту необходимо тщательно подготовится к исследованию:

  1. Последний прием пищи должен быть не позже 20 часов вечера. Накануне сдачи крови желательно употреблять продукты с минимальным количеством жиров. Тяжелая пища может способствовать получению ложноположительного или ложноотрицательного результатов. В этом случае пациенту придется пересдавать кровь на повторное исследование.
  2. Забор крови проводится утром, поскольку многим пациентам сложно обойтись без пищи длительное время.
  3. Перед посещением лаборатории запрещается курить, пить кофе и чаи. Вещество, содержащееся в табачном дыме и попавшее в кровь, может привести к получению ложноположительного или отрицательного результатов.
  4. Врачи не рекомендуют непосредственно перед сдачей анализов физически перегружать организм. Запрещено заниматься силовыми тренировками, избегать стрессовых ситуаций.
  5. За несколько дней до процедуры забора крови необходимо полностью отказаться от алкогольных напитков. Спирт может привести к искажению результатов и получению неверных значений.
  6. Перед сдачей анализов допускается выпить небольшое количество чистой питьевой воды без содержания газов.

Подготовка к анализам. Важные особенности

О чём необходимо знать, если вам предстоит сдать кровь на сифилис?

Любая реакция должна проводиться лишь натощак и утром. Накануне нельзя употреблять алкоголь и слишком жирную и тяжёлую пищу, так как может развиться ложная положительная реакция.

Если вам когда-то был выставлен диагноз сифилис, вы проходили этапы лечения по поводу этой патологии, то не стоит скрывать данную информацию от доктора. В любом случае результат вашей крови на сифилис не будет отрицательным, так как перенесение этой инфекции, неважно на каком этапе первичном или вторичном, непременно на это укажет. Отрицательным результат может быть в том случае, если вы никогда им не болели.

Но, как уже указывалось выше, может быть и ложная положительная реакция при определённых состояниях организма, что важно также знать, чтобы полученный результат не пугал пациента и предупреждать его об этом.

Не смотря на достаточно большое количество применяемых анализов (МРП, реакция Вассермана, иммуноблоттинг и другие) единственным наиболее точным и достоверным считается результат обнаружения бледной трепонемы с помощью ПЦР или микроскопии в нативном материале. Все остальные реакции позволяют подтвердить результат, особенно при наличии клиники.

Далеко не каждый человек знает, что это такое и как расшифровывается аббревиатура РПГА. Под этим сокращением подразумевается реакция пассивной гемагглютинации, методика нужна для определения патогенного процесса в организме.

Этот тест выявляет антигены бледной трепонемы (люис) – патогенного микроорганизма, провоцирующего возникновение сифилиса. Если обследуемый здоров и не страдает от каких-либо хронических заболеваний, при попадании в организм бледной трепонемы иммунитет начинает активно вырабатывать антитела.

Наличие в исследуемом биоматериале антител бледной трепонемы – основание для диагностирования сифилиса.

Условно тестирование на сифилис можно разделить на 2 вида:

  • специфическое;
  • неспецифическое.

Классификация анализа на категории зависит от вида антител, обнаруженных в полученном образце крови. Несмотря на то что впервые такой метод диагностики был проведен в 1965 году, тестирование оказалось настолько эффективным и результативным, что сегодня оно до сих пор не теряет актуальности.

Несомненным достоинством диагностики является то, что она позволяет обнаружить инфекцию на любом этапе развития, в том числе в латентной стадии.

Врачи советуют сдать анализ РПГА в следующих случаях:

  • у пациента проявляются клинические симптомы сифилиса (появление эрозий, язв, увеличение лимфоузлов) и регионарной лимфаденопатии; в этом случае РПГА на сифилис является незаменимым тестом, поскольку позволяет выявить болезнь на первичной, вторичной и третичной стадии;
  • возникновение признаков очаговой или диффузной алопеции;
  • если человек имел половой контакт с носителем сифилиса;
  • человек хочет стать донором, сдавать кровь и плазму;
  • РПГА входит в ежегодное профилактическое обследование, которое назначается работникам разных госучреждений;
  • при оформлении медицинской книжки;
  • при госпитализации.

Для осуществления тестирование требуется венозная кровь. Чтобы расшифровка была достоверной, пациенту необходимо ответственно подойти к подготовке к анализу и строго соблюдать врачебные советы.

  • сдавать биологический материал разрешено только на пустой желудок;
  • перед мероприятием (если сдача крови осуществляется днем или вечером) разрешено пить только минеральную воду без газов, употреблять жидкость нужно в небольших объемах;
  • за пару часов до сдачи биоматериала запрещено курить;
  • категорически запрещено употреблять спиртные напитки за двое суток до процедуры;
  • если пациент принимает какие-либо лечебные препараты, об этом непременно нужно предупредить лечащего врача;
  • если человек чувствует себя плохо, забор крови лучше перенести на другой день, поскольку это может негативно сказаться на расшифровке результата.

Получение результатов от анализа на РПГА

После сдачи пациентом крови на определение в его организме возбудителей сифилиса, проходит некоторое количество времени и становятся известны его результаты. Обычно, РПГА дает положительный показатель по прошествии четырех недель, следующих за первичным инфицированием.

Во многих случаях, первичная стадия развития болезни характеризуется пониженными показателями, ее данные таковы: меньше 1:320. Вторичная стадия сифилиса сопровождается увеличением показаний от титрования: чуть больше 1:320. Скрытый сифилис дает вновь заниженные показатели титров.

И это является не единичным случаем, а массовым и подтверждается на протяжении всей жизни у данной категории людей.

Показания к проведению

Несмотря на то, что главным показанием к проведению анализа является подозрение на заражение сифилисом, причин для назначения анализа на самом деле больше.

Среди них можно выделить:

  • выявление признаков заражения основным возбудителем и общая неблагоприятная клиническая картина больного;
  • при увеличении лимфоузлов на фоне появления высыпаний в виде язв;
  • также обследоваться должны родственники и близкие люди, находящиеся в близком контакте с заразившимся, переболевшим или обладающего признаками заражения человеком;
  • обследованию подлежат люди, желающие стать донорами крови;
  • анализ крови РПГА обязателен перед проведением хирургического вмешательства;
  • возможно назначение анализа при годовом профилактическом обследовании;
  • обязательно его проведение оформлении санкнижки;
  • в случае предположения о развитии некоторых других заболеваний — кори, дифтерии, сальмонеллёза, столбняка, коклюша.

Подготовка к сдаче анализа

Перед сдачей крови на наличие в ней возбудителей такого заболевания как сифилис, необходимо как следует подготовиться.

Ведь именно искажение данных такого важного анализа может стать причиной назначения больному неправильного лечения, а это, как известно, может стать причиной развития в организме других патологий.

Подготовку к проведению данного анализа довольно проста:

  1. Для начала следует отказать от любого приема пищи перед сдачей крови на РПГА. Другими словами на анализ следует приходить натощак.

  2. Употреблять значительное количество жидкостей перед сдачей крови на РПГА также не желательно. Компоненты принимаемых больным напитков также могут отразиться на результатах данного анализа.

  3. Сдавать данный анализ лучше всего в первой половине дня, так как вам будет довольно сложно обходиться без пищи и воды в течение всех суток.

  4. Перед проведением анализа на РПГА пациенту рекомендуют воздержать от курения в течение тридцати минут. 

    Содержащиеся в табачном дыме вещества, способны искажать достоверность результатов данного анализа.

  5. Употреблять перед сдачей крови спиртные напитки также категорически воспрещается.

Читайте:  Изучаем анализ крови: биохимия, расшифровка и норма анализа

Придя на анализ в соответствующий кабинет, необходимо освободить от одежды руку выше локтя. Кровь на данный анализ берется именно из области локтевой вены.

Сама процедура взятия образца крови довольно простая, и практически безболезненна. После процедуры, специалист лаборатории обязательно назначает время, когда можно будет прийти за готовыми результатами.

Особых мероприятий по подготовке к сдаче анализа не требуется. Важно не курить и не принимать алкоголь накануне обследования, отказаться от приёма пищи за 3-4 часа до начала исследования, пить можно только негазированную воду.

Что такое кровь на рпга

Желательно не волноваться.

Что может повлиять на результат

По причине высокой точности анализа повлиять на него могут некоторые факторы, не всегда относящиеся к заболеванию сифилисом.

Среди них:

  • инфицирование другими видами возбудителей – туберкулёз, мононуклеоз;
  • беременность;
  • заблаговременный приём антибиотиков или начало антибиотикотерапии;
  • заболевания онкологического характера;
  • аутоиммунные аномалии;
  • если ранее пациент имел заражение сифилисом, но прошёл успешную терапию (после первичного заражения результат РПГА носит положительный характер пожизненно).

РПГА применяется не только для обнаружения возбудителей сифилиса. Зачастую анализ применяется для обнаружения патологий кишечного характера.

На 4 день заражения сальмонеллёзом организмом начинают производиться специфичные антитела, которые обнаруживаются при помощи РПГА.

Так же метод хорош для выявления дифтерийной инфекции и оценки иммунитета после проведённой вакцинации. В данном случае антитела начинают свою активность уже на следующий день после заражения, что значительно ускоряет возможность проведения анализа. По точности и чувствительности метод проведения РПГА обходит даже бактериологический метод.

Анализ крови на РПГА часто применяется и для обнаружения бактериальной дизентерии. При этом его показательность намного выше, нежели у метода лабораторной диагностики посредством бактериального посева. Плюсом такого исследования является дополнительная возможность определения фазы приходящей диареи, в том числе острой и хронической. Так же анализ позволяет отличить шигеллез от нарушений эндокринной системы, колоректального рака и воспалительных процессов в толстой кишке.

Чаще всего положительный результат теста свидетельствует о наличии сифилиса (в 70% случаев) — как врожденного, так и приобретенного, а также может говорить о таких патологиях:

  • ВИЧ-инфекция;
  • разные формы гепатита;
  • недавно перенесенный инфаркт миокарда;
  • возвратный тиф;
  • туберкулез;
  • наличие венерических заболеваний;
  • клещевой боррелиоз;
  • дифтерия;
  • диффузные заболевания соединительной ткани;
  • злоупотребление наркотическими веществами (вводимыми путем инъекций);
  • наличие воспалительного процесса в ротовой полости или в районе гениталий;
  • формирование новообразований злокачественной природы;
  • инфекционный мононуклеоз.

Чтобы получить достоверные сведения, сдавать кровь нужно с учетом всех врачебных рекомендаций, в противном случае возбудитель сифилиса может быть не выявлен.

Как проводится исследование

Кровь забирается обычным способом из вены.

Точно сказать, как долго делается расшифровка результатов, невозможно. Скорость ее зависит от самого типа исследования, а также от применяемого оборудования.

Чаще всего РПГА расшифровывается в течение суток, но в некоторых случаях процедура может занять от 2 до 4 дней. Если лаборатория будет сильно загружена, пациенту выдадут бланк с результатами не раньше чем через 5 суток.

Для проведения РПГА берётся кровь из вены, полученный образец отправляют на исследование. Чтобы результаты были максимально точны и не искажены, важно правильно подготовиться к процедуре. Чтобы не пришлось сдавать кровь заново, необходимо руководствоваться следующими правилами перед визитом к специалисту:

  1. Кровь сдаётся ранним утром до 8-10 часов.
  2. Нельзя завтракать, пить чай или кофе, допустимо только употребление небольшого количества воды. Желательно, чтобы последний приём пищи был за 10-12 часов до анализа.
  3. Хотя бы за полчаса до обследования нельзя курить, но лучше всего сделать перерыв между сигаретами в 4-6 часов.
  4. В день анализа и минимум за сутки до него нельзя пить алкогольные напитки любой крепости.
  5. Если есть необходимость по графику принимать лекарства, об этом обязательно нужно сказать врачу, если нет возможности немного перенести это по времен.
  6. При плохом самочувствии или слабости нужно обязательно предупредить медсестру, которая забирает кровь для анализа, или врача.

Кровь из вены на РПГА

К подготовке важно относиться ответственно, поскольку от результатов анализа зависит многое, в особенности точная постановка диагноза.

Что такое кровь на рпга

Ошибки в диагностике и назначение неверного лечения могут привести к плачевным последствиям.

Возможно, Вам дали направление в лабораторию на анализ РПГА, но Вы не очень понимаете, что означает эта аббревиатура. Что это такое и насколько все серьезно Вы подробно узнаете из данной статьи.

Помимо пациентов с выраженными симптомами венерических заболеваний, направление на РПГА анализ могут дать людям, проходящим медицинское обследование с целью устройства на работу, перед проведением хирургической операции, или при становлении женщины на учет по беременности. Здесь нет ничего страшного и зазорного, просто, таким образом, специалисты анализируют население на предмет серьезных половых заболеваний, что позволяет своевременно выявить носителей инфекции и оказать им должную медицинскую помощь еще до развития осложнений.

Если Вы практикуете незащищенный секс (независимо от того, как хорошо Вы знакомы с сексуальным партнером, ведь многие люди сами не подозревают о своем заражении), либо подозреваете своего постоянного партнера, Вы можете спокойно сдать кровь и в скором времени узнать результат и развеять страх от неизвестности.

Как диагностируют сифилис?

Часто пациенты задаются вопросом, почему при подозрении на сифилис назначают именно РПГА. Специалисты уверяют, что тестирование является столь популярным, поскольку в 99% случаев дает правильный результат.

Реакция агглютинации не произойдет, только если в организме отсутствуют антитела трепонемы, в противном случае обследование обязательно покажет их присутствие.

Медицинская практика показывает, что чувствительность теста очень высока, причем положительная реакция будет выявлена даже при скрытых стадиях заболевания. Благодаря высокой результативности тест не теряет актуальности даже в настоящее время.

РПГА в диагностике сифилиса Что такое РПГА

В таблице 1 ниже мы привели возможные результаты анализов и их расшифровку. Как можно видеть в таблице, основное значение при расшифровке имеет комплексная оценка тестов.

Таблица 1 – Расшифровка результатов серологических реакций (анализов крови на сифилис). Для просмотра кликните по таблице

Оценка реактивности тестов выполняется также «крестами»:

  1. 1
    Максимальный ответ (резко положительная проба) обозначается с помощью 4-х крестов.
  2. 2
    Положительная проба обозначается с помощью 3-х крестов.
  3. 3
    Слабоположительную реакцию обозначают двумя крестами.
  4. 4
    Один крест свидетельствует о сомнительном и отрицательном результате.
  5. 5
    Отрицательный ответ маркируют знаком «минус».

Проблема оптимизации лабораторной диагностики сифилиса не потеряла свою актуальность до настоящего времени. Современные методы диагностики, несмотря на стремление учёных привести диагностику к максимально высоким показателям чувствительности и специфичности, требуют контрольной проверки и индивидуального подхода.

Особенностью сифилитической инфекции является феномен серорезистентности, который так и не получил научного объяснения. Диагноз выставляется после полноценного обследования больного эпидемиологическими, клиническими, лабораторными методами.

На фоне экономико-технического развития медицины наблюдается и прогресс в разработке новых критериев диагностики сифилиса. Всё это позволит быстро, успешно и безошибочно лечить пациентов.

Сифилис – это одна из патологий, для диагностирования которой очень важным является проведение лабораторных анализов.

Для диагностики сифилиса у пациента в настоящее время применяют следующие исследования:

  1. Проведение прямых тестов, в основе которых лежит результат непосредственного выделения возбудителя treponema pallidum из очагов поражения
  2. Проведение непрямых тестов (нетрепонемных тестов и трепонемных), в процессе которых при взятии крови пациента возможно выявление антител к возбудителю данного заболевания, а именно к treponema pallidum

Как правило, прямой метод позволяет точно выставить диагноз, если обнаруживается возбудитель. Результат можно считать отрицательным, если при проведении исследования биологического материала инфекционный агент не обнаружен. К прямым методам определения заболевания у человека относят темнопольную микроскопию, метод прямой иммунофлюоресценции, а также ПЦР.

Благодаря проведению непрямых методов удаётся установить наличие такой болезни, как сифилис, если инфекция протекает в скрытой форме, то есть без клинических проявлений. Непрямые методы диагностики сифилиса состоят из нетрепонемных тестов и трепонемных.

Перечень нетрепонемных тестов следующий: реакция Вассермана, реакция микропреципитации или РМП и реакция связывания комплемента или РСК.

Трепонемный тест – это проведение РИБТ крови или реакция иммобилизации бледных трепонем, РИФ или реакция иммунофлюоресценции крови, реакция пассивной гемагглютинации (РПГА), а также проведение иммуноферментного анализа. В последние годы для определения заболевания сифилис рекомендуется применять и учитывать результат в ходе такого метода, как иммунный блот или иммуноблотинг.

Сифилис относится к заболеваниям, передающимся половым путем. Оно имеет инфекционную природу, очень опасно и в большинстве случаев протекает тяжело.

Основным путем заражения является незащищенный половой акт (оральный, анальный, вагинальный) с зараженным партнером.

Иногда фиксируется бытовая передача:

  • через ранки на слизистых оболочках,
  • при поцелуях,
  • через предметы общего пользования (особенно обувь, полотенца, белье, расческу, бритву),
  • при переливании крови,
  • при наркомании через шприцы,

Возбудитель заболевания — бледная трепонема, бактерия из семейства спирохет. Инкубационный период длится, в среднем. 7-10 суток, реже — 21 день. Он начинается с момента заражения и до образования шанкра — твердого уплотненного образования на коже или слизистых оболочках.

Еще один признак заболевания, который проявляется на начальном этапе, — увеличение лимфоузлов.

При остром течении заболевания появляется лихорадка и обширная сыпь. В этом случае человеку необходимо пройти ряд диагностических процедур, среди которых одно из важных мест занимает РМП-исследование крови.

Исследование РПГА для диагностики других инфекций

Сдачу биоматериала на данное исследование часто назначают при подозрении на коклюш, на брюшной тиф, на иерсиниоз (острое инфекционное заболевание ЖКТ). Такая востребованность обусловлена тем, что по чувствительности и результативности РПГА превосходит практически все серологические анализы.

Тест помогает определить большую часть недугов, вызванных патогенными клетками и риккетсиями. При этом в роли антигенов можно использовать ингредиенты бактериальных вакцин, бактериальные экстракты (с коревым или коклюшным диагностикумом), очищенные антигены всевозможных микроорганизмов.

Реакция РПГА позволяет выявить не только сифилис, но и ряд других инфекционных заболеваний. Сдавать кровь понадобится, например, людям с подозрениями на острую кишечную инфекцию (сальмонеллез).

Болезнь провоцируют сальмонеллы, попадающие в организм человека. По мере развития сальмонеллеза постепенно разрушается структура ЖКТ, а также происходит сильная интоксикация. Основными симптомами кишечной инфекцией являются:

  • рвота;
  • диарея;
  • изменение запаха стула, а также появление в нём слизи или кровавых выделений;
  • боль в животе;
  • высокая температура;
  • озноб;
  • плохое самочувствие;
  • обезвоживание и пр.

Ещё одним заболеванием, для выявления которого можно применять РПГА, является корь. Она характеризуется поражениями слизистых глаза, ротовой полости и дыхательных путей. Кроме этого явными признаками болезни является сыпь на всём теле пациента, а также сильная интоксикация. Последняя сопровождается рвотой, нарушениями стула, нарушением водного баланса в организме и пр.

РПГА в диагностике сифилиса Трепонема

Исследование РПГА также может выявить столбняк, который является острой инфекцией.

Возбудитель этого заболевания легко проникает в организм через царапины, раны, порезы, ожоги и пр. Также можно заразиться столбняком, если в больницах или при косметических процедурах использовались нестерильные инструменты и материалы. Главными симптомами, по которым можно выявить столбняк, являются:

  • тонус мышц;
  • слабость;
  • раздражительность;
  • плохой аппетит;
  • апатия;
  • судороги в мышцах лица;
  • если столбняк следствие травмы, может ощущаться тянущая вокруг повреждённого участка тела;
  • затрудняется глотание воды и пищи.

Исследование РПГА также применяется для выявления коклюша на любой стадии. Это очень важно, поскольку на начальной стадии заболевания нет чётких симптомов, позволяющих его диагностировать. Подозрения на инфекцию чаще всего появляются уже на более поздних стадиях.

При коклюше может быть повышенная температура, однако точно так же она может оставаться в пределах нормы и не превышать стандартные 36,6. Позже у больного появляется кашель, приступы которого постепенно становятся всё чаще и сильнее.

Итак, реакция пассивной гемагглютинации является крайне эффективным методом диагностики сифилиса. Несмотря на то, что чаще всего РПГА используют для выявления антител бледной трепонемы, с помощью этого анализа можно установить наличие и других инфекций – кори, коклюша, сальмонеллеза и пр. Чтобы результаты исследования были максимально чёткими, важно правильно к ним готовиться и соблюдать все необходимые условия.

РПГА анализ – методика, являющаяся одной из наиболее важных среди прочих исследований крови. С помощью неё можно определить развитие неприятных болезней кишечно-инфекционного характера. Но зачастую анализ используется для выявления сифилиса. Исследование имеет высокую точность, достоверность.

РПГА в диагностике сифилиса РПГА качественный

РПГА расшифровывается, как реакция пассивной гемагглютинации.

Основные преимущества метода

Данная методика активно используется по всему миру не только потому, что она является очень результативной, но и из-за определенных преимуществ:

  • проведение теста не представляет сложности, от пациента требуется лишь сдать кровь;
  • для проведения исследования не нужно специальное оборудование;
  • исследование не занимает много времени, обычно пациенту оглашают результат в течение 24 часов;
  • тест имеет высокую чувствительность и специфичность к сифилису.

Что значит положительный результат?

Главным образом это означает развитие в организме сифилисной инфекции. Но не всегда утвердительный результат говорит только лишь об инфекции.

Среди причин могут быть:

  • беременность;
  • гепатиты видов В и С;
  • инфаркт в острой форме;
  • сифилис во вторичной, третичной или скрытой фазах;
  • наличие в организме ВИЧ-инфекции;
  • употребление наркотиков в виде инъекций;
  • патологии соединительной ткани;
  • лептоспироз;
  • новообразования злокачественного характера;
  • клещевой боррелиоз;
  • тиф возвратного типа;
  • географические варианты эндемического сифилиса;
  • воспалительные процессы на фоне сифилиса;
  • туберкулёз;
  • бактериальный эндокардит;
  • травмы обширного характера и переломы;
  • инфекционный мононуклеоз;
  • реакция после проведённой вакцины.

Выход в случае обнаружения положительного результата один – в срочном порядке нужно обратиться к врачу.

Только после всестороннего обследования специалист сможет составить полную картину о прогрессирующем заболевании и назначить медикаментозное и дополнительное лечение.

Медикаментозное лечение подразумевает применение разного спектра антибиотиков – пенициллина, эритромицина или тетрациклина. В тяжёлых случаях добавляют пиротерапию, в ходе которой искусственным образом повышают температуру тела больного, и внутримышечные инъекции антибактериальных препаратов. При протекании третичного сифилиса могут применяться высокотоксичные препараты, основанные на добавлении висмута, как дополнение к антибиотикам.

Причинами появления неопределённого или ложноположительного результата могут быть следующие параметры:

  1. Беременность;
  2. Наличие менструации на момент проведения анализа;
  3. Начальный период после проведения вакцинации;
  4. Недавно перенесённый инфаркт миокарда;
  5. Недавно перенесённые или ныне развивающиеся заболевания инфекционного характера (ВИЧ-инфекция, грипп, оспа, гепатит, респираторные инфекции);
  6. Онко- и аутоиммунные заболевания;
  7. Патологии печени, почек и других внутренних органов.

Точность результата

Многочисленные клинические исследования подтвердили, что такое эта методика дает гарантированно правильный результат, если анализ проводился при соблюдении всех правил и пациент строго придерживался врачебных рекомендаций перед забором крови.

Если тестирование дало положительный ответ, вероятность того, что человек инфицирован сифилисом, составляет более 95%
.

Неправильная реакция может проявиться только в тех случаях, если с момента инфицирования прошло слишком мало времени либо лаборант не соблюдал инструкцию при исследовании.

Что касается ложноположительного результата, то он может быть, если диагностика проводилась при наличии инфекционных заболеваний или патологических состояний.

Ложный результат отличается от истинного положительного тем, что он очень быстро становится отрицательным, если тестирование провести повторно через 2 недели.

На данный момент анализ РПГА до сих пор остается самым эффективным и достоверным тестом определения сифилиса и прочих опасных патологий. Поэтому при подозрении на наличие многих заболеваний первым делом медики направляют пациента на РПГА.

Сифилис – заболевание инфекционной природы, обусловленное спирохетой Treponema pallidum, склонное к прогредиентному хроническому течению, с чёткой периодизацией клинической симптоматики.

Преобладание полового пути передачи над контактным и трансплацентарным ставит это заболевание в ряд венерических (ЗППП, ИППП). Помимо указанных способов передачи инфекции особую роль играет артифициальный путь (от лат. «artificio» – искусственно созданный).

Он характерен для медицинских учреждений, в основном, реализуется в условиях стационара. Инфицирование происходит при гемотрансфузиях, различных хирургических операциях, инвазивных диагностических методах.

Несмотря на карантинизацию донорской крови, проблема выявления сифилиса у доноров на разных стадиях заболевания все ещё актуальна.

Поэтому диагностические мероприятия при сифилисе требуют стандартизации, внедрения новых чувствительных и информативных методов идентификации, а также сведения к минимуму ошибок и неправильной трактовки результатов анализов.

    Показать всё

    1.
    Классификация методов лабораторной диагностики

    Диагностика сифилиса имеет некоторые особенности и отличается от диагностики других бактериальных инфекций. Сложное строение и антигенные свойства бледной трепонемы обусловливают ошибки в интерпретации результатов серологических реакций.

    Сдать анализ крови на сифилис предлагают 3 основным группам пациентов:

    1. 1
      Скрининг и диспансеризация групп населения (в том числе и беременность, постановка на учет в женской консультации, поступление на работу и оформление медкнижки и так далее).
    2. 2
      Скрининг в группах риска (незащищенные половые контакты с человеком, инфицированным сифилисом, лица после принудительных сексуальных контактов, ВИЧ-инфицированные и так далее).
    3. 3
      Лица, имеющие симптомы заболевания, или лица с подозрением на сифилитическую инфекцию.

    Все лабораторные методы условно подразделяют на прямые и непрямые.

    1.1.
    Прямые методы

    1. 1
      Идентификация Treponema pallidum в тёмном поле (темнопольная микроскопия).
    2. 2
      Заражение подопытных животных (культивирование в лабораторных животных).
    3. 3
      ПЦР (полимеразно-цепная реакция).
    4. 4
      ДНК-зонд или гибридизация нуклеиновых кислот.

    1.2.
    Непрямые методы

    Серологические реакции – это методы лабораторной диагностики, базирующиеся на обнаружении антител (сокращенно АТ) к антигенам бледной трепонемы (сокращенно АГ). Они имеют основное значение для подтверждения диагноза.

    1. 1
      Нетрепонемные тесты:

      • Реакция Вассермана (РСК);
      • Реакция микропреципитации (МР, РМП) и ее аналоги, которые приведены ниже;
      • Тест быстрых плазменных реагинов (RPR, РПР);
      • Тест с красным толуидином и сывороткой (TRUST);
      • Нетрепонемный тест Лаборатории исследования венерических болезней – VDRL.
    2. 2
      Трепонемные тесты:

      • Р-ция иммобилизации Treponema pallidum – РИБТ/РИТ;
      • Р-ция иммунофлюоресценции – РИФ, FTA (разведения сывороток РИФ-10, РИФ-200, РИФ-абс);
      • Р-ция пассивной гемагглютинации (РПГА, ТРПГА, TPHA);
      • Иммуноферментный анализ (ИФА, EIA);
      • Иммуноблоттинг.

    Рисунок 1 – Алгоритм серодиагностики сифилиса

    1.3.
    Гистоморфологические методы

    Эти методы сводятся к выявлению особенностей гистоморфологии сифилитических проявлений. Внимание уделяется тонкостям строения твёрдого шанкра. Однако, дифференциальная диагностика инфекции с помощью гистологии весьма затруднительна. Гистоморфология используется с другими лабораторными и клиническими тестами.

    2.
    Микроскопия Treponema pallidum в тёмном поле

    Этот метод основывается на непосредственном обнаружении бледной трепонемы в исследуемом материале с помощью микроскопа и специальных приспособлений (чаще всего отделяемое эрозий и язв, реже спинномозговая жидкость и другие субстраты).

    С помощью скарификации, соскоба, сдавливания с эрозий и язвенных дефектов получают экссудат, затем исследуют в микроскоп подготовленный препарат.

    Обычно бледные трепонемы выявляют в препарате, полученном из шанкра, из очагов вторичного свежего, вторичного рецидивного сифилиса, а также пунктата лимфоузлов, плаценты.

    Основанный на феномене свечения мелких частиц в тёмном поле при попадании луча света (феномен Тиндаля), метод прекрасно позволяет дифференцировать возбудителя сифилиса от других трепонем на основании морфологических отличий и отличий в способах передвижения бактерии.

    Для микроскопии используют специальный темнопольный конденсор соответствующего оптического разрешения. Препарат получают способом раздавленной капли (каплю материала наносят на чистое обезжиренное предметное стекло и закрывают очень тонким покровным).

    На покровное стекло капают иммерсионное масло. С помощью поворота тубуса и поворота увеличивающей линзы регулируют нужное освещение.

    В тёмном поле микроскопа обнаруживаются клетки крови, эпителиальные клетки и сам возбудитель сифилиса. Бледная трепонема выглядит как спираль, очень тонкая, излучающая серебристый цвет, с плавными движениями.

    Рисунок 2 – Темнопольная микроскопия как способ визуализации бледной трепонемы в исследуемом материале. Источник иллюстрации – CDC

    Treponema pallidum необходимо отличать от других трепонем, в том числе и Tr. refringens, которая может содержаться в ротоглотке и на слизистой половых органов. Эта бактерия совершает хаотичные движения, имеет широкие и несимметричные, довольно грубые завитки. Кроме того, Treponema pallidum отличают от Tr. Microdentium, Tr. Buccalis и Tr. vincenti.

    Визуализация бактерий в тёмном поле иногда дополняется реакцией флюоресценции. Для этого меченые флюоресцирующим красителем противотрепонемные АТ добавляют в нативный материал. При этом образуется комплекс, называемый антиген-антитело (сокращенно АГ-АТ), который и является объектом для исследования с помощью люминесцентного микроскопа.

    3.
    Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР)

    ПЦР, разработанная в 1991 году для обнаружения молекулы дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК) бледной трепонемы, является высокочувствительным и специфичным, позволяет выявить фрагменты ДНК возбудителя.

    Базируется данный анализ на копировании коротких участков ДНК бледной спирохеты, который удовлетворяет заданным параметрам и присутствует в образце. Всё это выполняется в искусственных условиях (in vitro). Реакция проводится в приборе – амплификаторе, который обеспечивает периодизацию температурных циклов. Происходит охлаждение с последующим нагреванием пробирок с погрешностью в 0,1˚С.

    ДНК-матрицу прогревают в течение 2 минут при температуре 92-98˚С (максимальная температура используется, если полимераза термостабильна). При нагревании цепи ДНК расходятся из-за распада водородных связей между ними. В стадии отжига температуру реакции снижают для связывания праймера с одноцепочечной матрицей.

    Отжиг занимает около 30 секунд, в течение этого времени синтезируются сотни нуклеотидов. Вновь синтезируемые молекулы копируются полимеразой, в результате многократно увеличиваются специфические фрагменты дезоксирибонуклеиновой кислоты. Последующая детекция фрагментов проводится с помощью электрофореза в геле агар.

    ПЦР-диагностика сифилиса пока носит экспериментальный характер, но оправдана при выявлении врождённой инфекции, в сложных диагностических случаях или при минимальном содержании бледных трепонем в исследуемом материале.

    4.
    ДНК-гибридизация

    ДНК-гибридизация выполняется in vitro и основана на полном или частичном соединении двух одноцепочечных молекул ДНК в одну молекулу. В случае полного соответствия комплементарных фрагментов объединение происходит легко. Если комплементарное соответствие частичное, то объединение цепочек ДНК происходит медленно. На основании времени слияния цепей можно оценить степень комплементарности.

    При нагреве ДНК в буферном растворе разрываются водородные связи азотистыми основаниями, являющимися комплементарными, в результате цепочки ДНК расходятся. Далее получают препарат из двух денатурированных дезоксирибонуклеиновых кислот. При охлаждении одноцепочечные участки ренатурируют. Образуется так называемый гибрид ДНК.

    Метод позволяет оценить и анализировать скорость отжига, учитывая особенности (сходства и различия) ДНК между видами или внутри вида.

    Применение ДНК-зонда заключается в гибридизации меченого фрагмента ДНК со специфичным участком ДНК для идентификации комплементарных последовательностей нуклеотидов. Для метки зонда используется группа ненасыщенных атомов (хромофоры) или радиоактивные изотопы.

    ДНК–зонд применяют для гетерогенного и гомогенного детектирования нуклеиновых кислот. Роль зонда заключается в определении участков, на которых произошло слияние мишень-зонд. Детектирование в гомогенной системе имеет преимущество – позволяет отследить гибридизацию молекул ДНК в реальном времени.

    Суть метода сводится в денатурации ДНК и ренатурации (воссоединения цепочек ДНК). Процесс ренатурации нуклеиновой кислоты и ДНК-зонда заканчивается образованием «гибрида».

    Специфические последовательности нуклеиновых кислот гибридизуются с ДНК–зондом и, таким образом, выявляются и позволяют оценить количество ДНК в исследуемом материале.

    5.
    Заражение лабораторных животных

    Высокая чувствительность кроликов к Treponema pallidum (порядка 99,9%) позволяет применять их в диагностике сифилитической инфекции.

    Заражение кроликов проводится в научно-исследовательских центрах и является «золотым стандартом» оценки чувствительности других методов.

    Вернёмся к трепонемным и нетрепонемным тестам, так как они используются чаще всего. Рассмотрим их преимущества и недостатки, а также ошибки в интерпретации результатов.

    6.
    Нетрепонемные тесты

    Это тесты определения антител IgG и IgM к стандартизированному кардиолипиновому антигену. Их существенным недостатком является сравнительно небольшая специфичность.

    Низкая стоимость и простота выполнения позволяют отнести эти тесты к отборочным диагностическим, необходимым для установки предварительного диагноза и скрининга среди населения.

    Именно нетрепонемные тесты сдаются при оформлении медицинской книжки, устройстве на работу, постановке на учет в женской консультации.

    Недостатки:

    1. 1
      Минимальная чувствительность в стадии сифилиса первичного – 70%;
    2. 2
      Минимальная чувствительность в стадии сифилиса позднего – 30%;
    3. 3
      Возможность появления ложноотрицательных и ложноположительных результатов;
    4. 4
      Трудоёмкость выполнения РСК.

    Преимущества:

    1. 1
      Относительно маленькая стоимость производства тестов;
    2. 2
      Получение быстрого ответа;
    3. 3
      Возможность их применения для скрининга.

    Получение ложноположительных или слабоположительных проб возможно в следующих случаях:

    1. 1
      Нарушение технологии выполнения, при блокировании комплекса АГ-АТ.
    2. 2
      Наличие у больного аутоиммунных заболеваний (ревматоидный артирит, ревматизм, склеродермия, системная красная волчанка, саркоидоз и др.).
    3. 3
      Злокачественные новообразования.
    4. 4
      Вирусные и бактериальные инфекции.
    5. 5
      Эндокринные заболевания (аутоиммунный тиреоидит, сахарный диабет).
    6. 6
      Беременность.
    7. 7
      Употребление алкоголя.
    8. 8
      Приём жирной пищи.
    9. 9
      Старческий возраст.

    Как видно из списка, существует достаточно причин для неверного результата. Поэтому к нему следует весьма настороженно относиться. Рассмотрим наряду с РСК ещё две пробы. Это реакция микропреципитации и VDLR (ее модификация).

    7.
    Реакция связывания комплемента (РСК, Вассермана, RW)

    Это проба, основанная на способности комплемента связываться с комплексами АГ-АТ. Идентифицируют образовавшийся комплекс с помощью гемолитической системы. Кардиолипиновый антиген заметно повышает чувствительность пробы.

    Чувствительной является и реакция Колмера, которая заключается в выполнении при различных температурных режимах. Так, первая фаза реакции Колмера протекает при температуре 20˚С в течение получаса, вторая фаза при тепературе 4-8˚С на протяжении 20-ти часов. За это время происходит связывание комплемента.

    При выполнении РСК возможно получение резко положительных результатов. Причиной, вероятно, является большой титр антител в неразведенной сыворотке. В этом случае пробы ставят с уменьшающими дозами.

    Для дифференцировки стадий сифилиса и оценки эффективности противосифилитического лечения определяют количество АТ в сыворотке.

    Позитивность пробы оценивают с помощью крестов, также в реакциях Вассермана, Колмера и Канна указывается разведение сыворотки.

    8.
    Реакция микропреципитации

    Так как трудоёмкость выполнения вышеуказанных проб велика, то для широты обхвата диспансеризацией разных групп населения разработан ускоренный способ серодиагностики сифилиса, так называемый экспресс-метод – реакция микропреципитации (сокращенно МР, РМП).

    Она выполняется с кардиолипиновым антигеном и вспомогательными веществами. Его преимуществом является забор периферической крови для исследования. Это значительно ускоряет и саму методику, и работу лаборантов.

    Рисунок 2 – Реакция микропреципитации (схема)

    Для проведения МР необходимы плазма или инактивированная сыворотка крови пациента (именно они содержат антитела). Далее плазму помещают в маркированные лунки. Затем, к исследуемому материалу добавляют каплю кардиолипинового антигена, смешивают и встряхивают. В итоге в сыворотке инфицированного появляются характерные хлопья, разные по степени интенсивности.

    Это качественная проба. При количественной оценке используются 10 разведений сыворотки, помещаемой в 10 лунок с соответствующей маркировкой. При качественной МР ответ указывается в виде крестов (плюсов) или минуса, при количественной указывается титр антител (1:2, 1:4 и так далее).

    Наличие хлопьев расценивается как положительный или слабоположительный ответ. Возможно появление флокулята и при отсутствии заболевания, поэтому окончательную оценку полученного результата проводят после контрольного исследования или проведения других реакций (РИБТ, РИФ, ИФА, РПГА).

    9.
    VDRL

    Рекомендованный Всемирной организацией здравоохранения метод постановки реакции с антигеном липоидной природы (АГ) по праву считается лучшим среди других стандартных нетрепонемных тестов. Разработан в США, штате Джорджиа в лаборатории венерических болезней (Veneral Diseases Research Laboratories).

    Аббревиатура учреждения послужила названием для пробы – VDRL. VDRL – это модификация МР. Сыворотку от больного сифилисом инактивируют и помещают на предметное стекло. Используемый антиген состоит из кардиолипина, холестерина и лецитина в разном процентном соотношении. Ответ регистрируется практически сразу.

    Отчётливая флокуляция возникает в присутствии в сыворотке антител. Сыворотка становится реактивна по прошествии 4-х недель после заражения. Для оценки количества антител, сыворотку предварительно разводят в геометрической прогрессии.

    Преимущества VDRL:

    1. 1
      сравнительно высокая чувствительность;
    2. 2
      сравнительно высокая специфичность;
    3. 3
      легкость выполнения;
    4. 4
      малая стоимость реактивов;
    5. 5
      получение быстрого ответа.

    Недостатком VDRL является относительно высокая частота ложноположительных результатов.

    Их причинами являются всё те же перечисленные выше заболевания.

    Трепонемные тесты исполняются со специфическими АГ Treponema pallidum. Они необходимы и обязательны для установления окончательного диагноза. Это реакция иммунофлюоресценции (РИФ), реакции непрямой гемагглютинации (РПГА), иммуноферментный анализ (ИФА) и др.

    После положительного результата нетрепонемного теста (RPR, MP, VDRL) всегда должны выполняться трепонемные (чаще комбинация – РПГА, ИФА, РИФ).

    Трепонемные тесты более сложны в исполнении, чем экспресс-тесты, и требуют больших затрат денежных средств.

    10.
    РИФ

    Данная реакция (сокращенно РИФ) используется для диагностики сифилиса, в том числе и скрытых форм, и перепроверки положительных и ложноположительных проб.

    РИФ основана на свечении меченых антител при соединении с комплексом антиген-антитело под кварцевой лампой. Метод начал применяться в 60-х годах и отличался простотой выполнения и высокой специфичностью (которая немного уступает РИБТ).

    Он имеет несколько модификаций: РИФ-10, РИФ-200 и РИФ-abs.

    Наиболее чувствительна РИФ в разведении 10 раз, а остальные – более специфичны. РИФ проводится в двух фазах. К АГ добавляют сыворотку крови пациента. Образуется комплекс АГ-АТ, который исследуется в следующей фазе. Далее меченный с помощью флюоохрома комплекс идентифицируют при микроскопии. Если не наблюдается свечение, это указывает на отсутствие специфических АТ в сыворотке крови.

    РИФ-200 является наиболее ценным из всех разведений. Метод предназначен для диагностики различных форм сифилиса, особенно скрытого сифилиса и перепроверки положительных проб.

    11.
    РИБТ

    Реакция иммобилизации бледных трепонем (сокращено РИБТ, РИТ) одна из сложных серологических проб, требующих значительных усилий и финансовых затрат. РИБТ применяют все реже, но актуальность ее сохраняется в диагностике скрытого сифилиса.

    Большое значение она несёт в распознавании ложноположительных результатов у беременных женщин и основывается на иммобилизации бактерий в присутствии иммобилизинов – поздних антител.

    Результат оценивается на процентном количестве (%) иммобилизированных трепонем с помощью специальной таблицы:

    1. 1
      От 0 до 20 – отрицательная проба.
    2. 2
      От 21 до 50 – слабоположительная проба.
    3. 3
      От 50 до 100 – положительная реакция.

    Ложноположительные результаты также возможны при применении РИБТ. Так, неверный ответ возможен при инфицировании тропическими трепанематозами, а также, при туберкулёзе, циррозе печени, саркоидозе и пациентов старческого возраста.

    12.
    РПГА

    Этот анализ крови на сифилис называется реакцией пассивной гемагглютинации (сокращенно, кровь на РПГА, ТРПГА).

    Антиген для РПГА приготавливают из эритроцитов барана, покрытых фрагментами бледных трепонем (полученных от инфицированных кроликов (см. рисунок 4)). Для анализа используется венозная кровь (плазма или инактивированная сыворотка) пациента.

    При добавлении антигена в сыворотку пациента с сифилисом происходит образование комплекса АГ-АТ, который приводит к агглютинации эритроцитов. агглютинация определяется субъективно врачом-лаборантом.

    Рисунок 3 – Схема РПГА (реакция пассивной гемагглютинации)

    Проба оценивается как положительная при появлении агглютинатов равномерной розовой окраски. Окрашивание преципитата в красный свидетельствует об осаждении эритроцитов. РПГА является высокочувствительной и высокоспецифичной.

    12.1.
    Реакция микрогемагглютинации

    Она является упрощённым вариантом РПГА. Отличается от пробы, описанной выше, меньшим количеством антигена, разбавителя и сыворотки крови для выполнения реакции. Через 4 часа после инкубации сыворотки можно оценить пробу. Используется при скрининговых и массовых обследованиях на сифилис.

    13.
    Иммуноферментный анализ

    Иммуноферментный анализ (сокращенно ИФА) базируется на специфической реакции антиген-антитело. Биологический материал (сыворотка крови пациента, ликвор) вносят в лунки, на твердой поверхности которых фиксированы антигены бледной трепонемы. Исследуемый материал инкубируют, затем отмывают антитела, не связавшиеся с антигенами (см. рисунок 5).

    Идентификация полученного комплекса осуществляется на этапе ферментации с помощью иммунной сыворотки, меченной ферментом. При химической реакции фермент окрашивает полученные комплексы. Интенсивность окрашивания зависит от количества специфических антител в крови пациента и фиксируется спектрофотометром.

    Рисунок 4 – Схема ИФА (иммуноферментного анализа)

    Чувствительность ИФА составляет более 95% . Метод используется в автоматизированном режиме для исследования декретируемых групп населения: доноров, беременных и других, для уточнения диагноза при положительных и ложноположительных нетрепонемных тестах.

    14.
    Иммуноблоттинг

    Иммуноблоттинг – высокочувствительный метод, модификация простого ИФА. Реакция основана на электрофорезе с разделением антигенов бледных трепонем.

    Разделенные иммунодетерминанты переносят на нитроцеллюлозную бумагу и проявляют в ИФА. Далее инкубируют сыворотку и смывают не связавшиеся антитела. Полученный материал обрабатывают иммуноглобулинами (IgМ или IgG), меченными ферментом.

    15.
    Клиническая оценка результатов лабораторной диагностики сифилиса

    В таблице 1 ниже мы привели возможные результаты анализов и их расшифровку. Как можно видеть в таблице, основное значение при расшифровке имеет комплексная оценка тестов.

    Таблица 1 – Расшифровка результатов серологических реакций (анализов крови на сифилис). Для просмотра кликните по таблице

    Оценка реактивности тестов выполняется также «крестами»:

    1. 1
      Максимальный ответ (резко положительная проба) обозначается с помощью 4-х крестов.
    2. 2
      Положительная проба обозначается с помощью 3-х крестов.
    3. 3
      Слабоположительную реакцию обозначают двумя крестами.
    4. 4
      Один крест свидетельствует о сомнительном и отрицательном результате.
    5. 5
      Отрицательный ответ маркируют знаком «минус».

    Проблема оптимизации лабораторной диагностики сифилиса не потеряла свою актуальность до настоящего времени. Современные методы диагностики, несмотря на стремление учёных привести диагностику к максимально высоким показателям чувствительности и специфичности, требуют контрольной проверки и индивидуального подхода.

    Особенностью сифилитической инфекции является феномен серорезистентности, который так и не получил научного объяснения. Диагноз выставляется после полноценного обследования больного эпидемиологическими, клиническими, лабораторными методами.

    На фоне экономико-технического развития медицины наблюдается и прогресс в разработке новых критериев диагностики сифилиса. Всё это позволит быстро, успешно и безошибочно лечить пациентов.

1.
Классификация методов лабораторной диагностики

Диагностика сифилиса имеет некоторые особенности и отличается от диагностики других бактериальных инфекций. Сложное строение и антигенные свойства бледной трепонемы обусловливают ошибки в интерпретации результатов серологических реакций.

Сдать анализ крови на сифилис предлагают 3 основным группам пациентов:

  1. 1
    Скрининг и диспансеризация групп населения (в том числе и беременность, постановка на учет в женской консультации, поступление на работу и оформление медкнижки и так далее).
  2. 2
    Скрининг в группах риска (незащищенные половые контакты с человеком, инфицированным сифилисом, лица после принудительных сексуальных контактов, ВИЧ-инфицированные и так далее).
  3. 3
    Лица, имеющие симптомы заболевания, или лица с подозрением на сифилитическую инфекцию.

Все лабораторные методы условно подразделяют на прямые и непрямые.

  1. 1
    Идентификация Treponema pallidum в тёмном поле (темнопольная микроскопия).
  2. 2
    Заражение подопытных животных (культивирование в лабораторных животных).
  3. 3
    ПЦР (полимеразно-цепная реакция).
  4. 4
    ДНК-зонд или гибридизация нуклеиновых кислот.

Серологические реакции – это методы лабораторной диагностики, базирующиеся на обнаружении антител (сокращенно АТ) к антигенам бледной трепонемы (сокращенно АГ). Они имеют основное значение для подтверждения диагноза.

  1. 1
    Нетрепонемные тесты:

    • Реакция Вассермана (РСК);
    • Реакция микропреципитации (МР, РМП) и ее аналоги, которые приведены ниже;
    • Тест быстрых плазменных реагинов (RPR, РПР);
    • Тест с красным толуидином и сывороткой (TRUST);
    • Нетрепонемный тест Лаборатории исследования венерических болезней – VDRL.
  2. 2
    Трепонемные тесты:

    • Р-ция иммобилизации Treponema pallidum – РИБТ/РИТ;
    • Р-ция иммунофлюоресценции – РИФ, FTA (разведения сывороток РИФ-10, РИФ-200, РИФ-абс);
    • Р-ция пассивной гемагглютинации (РПГА, ТРПГА, TPHA);
    • Иммуноферментный анализ (ИФА, EIA);
    • Иммуноблоттинг.

Рисунок 1 – Алгоритм серодиагностики сифилиса

Эти методы сводятся к выявлению особенностей гистоморфологии сифилитических проявлений. Внимание уделяется тонкостям строения твёрдого шанкра. Однако, дифференциальная диагностика инфекции с помощью гистологии весьма затруднительна. Гистоморфология используется с другими лабораторными и клиническими тестами.

Высокая чувствительность кроликов к Treponema pallidum (порядка 99,9%) позволяет применять их в диагностике сифилитической инфекции.

Вернёмся к трепонемным и нетрепонемным тестам, так как они используются чаще всего. Рассмотрим их преимущества и недостатки, а также ошибки в интерпретации результатов.

Альтернативы анализа РПГА

Ни одна из методик не даёт 100% гарантии точного результата. Отклонения в отдельных случаях могут доходить до 10%.

По этой причине врач назначает комплексное обследование, включающее в себя несколько видов исследования.

Серологический анализ – включает в себя неспецифические и специфические тесты.

Подобный вид анализа полезен при недостаточной симптоматике или при её отсутствии.

Неспецифические тесты – это:

  • микрореакция преципитации – используется по истечению одного месяца после заражения;
  • реакция Вассермана – используется по истечению 6 недель после начала инфицирования.

Для обоих видов забирается кровь из пальца, спинномозговая жидкость.

Специфические тесты – это:

  • реакция иммунофлюоресценции – подходит для ранних стадий заболевания, в качестве материала используется капиллярная кровь или из вены;
  • иммуноферментный анализ – один из самых точных видов анализа, используется после выполнения неспецифических тестов либо в качестве комплексной диагностики;
  • реакция иммобилизации бледных трепонем – ещё один распространённый и точный анализ, применяется только спустя 4 месяца после заражения, материал забирается из вены;
  • иммуноблотинг – является новым методом, используемым для подтверждения результатов других анализов, очень точен, но обладает высокой стоимостью.

Лабораторный анализ – быстрый и относительно недорогой метод исследования. В качестве материала используются пробы язв и эрозий, грудное молоко, сперма.

При наличии отрицательного результата проводят дополнительный анализ, порой не один раз.

Анализ РПГА можно назвать довольно широко применяемым методом диагностирования инфекционных и бактериологических аномалий. Заболевания подобного характера весьма опасны как для организма самого больного, так и для окружающих его близких людей. По этой причине важно своевременно обращаться к врачу со времени появления первых признаков болезни для пресечения распространения недуга и перехода его в хроническую форму.

2.
Микроскопия Treponema pallidum в тёмном поле

С помощью скарификации, соскоба, сдавливания с эрозий и язвенных дефектов получают экссудат, затем исследуют в микроскоп подготовленный препарат.

Обычно бледные трепонемы выявляют в препарате, полученном из шанкра, из очагов вторичного свежего, вторичного рецидивного сифилиса, а также пунктата лимфоузлов, плаценты.

Основанный на феномене свечения мелких частиц в тёмном поле при попадании луча света (феномен Тиндаля), метод прекрасно позволяет дифференцировать возбудителя сифилиса от других трепонем на основании морфологических отличий и отличий в способах передвижения бактерии.

Для микроскопии используют специальный темнопольный конденсор соответствующего оптического разрешения. Препарат получают способом раздавленной капли (каплю материала наносят на чистое обезжиренное предметное стекло и закрывают очень тонким покровным).

На покровное стекло капают иммерсионное масло. С помощью поворота тубуса и поворота увеличивающей линзы регулируют нужное освещение.

В тёмном поле микроскопа обнаруживаются клетки крови, эпителиальные клетки и сам возбудитель сифилиса. Бледная трепонема выглядит как спираль, очень тонкая, излучающая серебристый цвет, с плавными движениями.

Рисунок 2 – Темнопольная микроскопия как способ визуализации бледной трепонемы в исследуемом материале. Источник иллюстрации – CDC

Treponema pallidum необходимо отличать от других трепонем, в том числе и Tr. refringens, которая может содержаться в ротоглотке и на слизистой половых органов. Эта бактерия совершает хаотичные движения, имеет широкие и несимметричные, довольно грубые завитки. Кроме того, Treponema pallidum отличают от Tr. Microdentium, Tr. Buccalis и Tr. vincenti.

Визуализация бактерий в тёмном поле иногда дополняется реакцией флюоресценции. Для этого меченые флюоресцирующим красителем противотрепонемные АТ добавляют в нативный материал. При этом образуется комплекс, называемый антиген-антитело (сокращенно АГ-АТ), который и является объектом для исследования с помощью люминесцентного микроскопа.

Расшифровка результатов нетрепонемных тестов

ПЦР, разработанная в 1991 году для обнаружения молекулы дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК) бледной трепонемы, является высокочувствительным и специфичным, позволяет выявить фрагменты ДНК возбудителя.

Базируется данный анализ на копировании коротких участков ДНК бледной спирохеты, который удовлетворяет заданным параметрам и присутствует в образце. Всё это выполняется в искусственных условиях (in vitro). Реакция проводится в приборе – амплификаторе, который обеспечивает периодизацию температурных циклов. Происходит охлаждение с последующим нагреванием пробирок с погрешностью в 0,1˚С.

ДНК-матрицу прогревают в течение 2 минут при температуре 92-98˚С (максимальная температура используется, если полимераза термостабильна). При нагревании цепи ДНК расходятся из-за распада водородных связей между ними. В стадии отжига температуру реакции снижают для связывания праймера с одноцепочечной матрицей.

Отжиг занимает около 30 секунд, в течение этого времени синтезируются сотни нуклеотидов. Вновь синтезируемые молекулы копируются полимеразой, в результате многократно увеличиваются специфические фрагменты дезоксирибонуклеиновой кислоты. Последующая детекция фрагментов проводится с помощью электрофореза в геле агар.

Это тесты определения антител IgG и IgM к стандартизированному кардиолипиновому антигену. Их существенным недостатком является сравнительно небольшая специфичность.

Низкая стоимость и простота выполнения позволяют отнести эти тесты к отборочным диагностическим, необходимым для установки предварительного диагноза и скрининга среди населения.

РПГА в диагностике сифилиса РПГА полуколичественный

Именно нетрепонемные тесты сдаются при оформлении медицинской книжки, устройстве на работу, постановке на учет в женской консультации.

Недостатки:

  1. 1
    Минимальная чувствительность в стадии сифилиса первичного – 70%;
  2. 2
    Минимальная чувствительность в стадии сифилиса позднего – 30%;
  3. 3
    Возможность появления ложноотрицательных и ложноположительных результатов;
  4. 4
    Трудоёмкость выполнения РСК.

Преимущества:

  1. 1
    Относительно маленькая стоимость производства тестов;
  2. 2
    Получение быстрого ответа;
  3. 3
    Возможность их применения для скрининга.

Получение ложноположительных или слабоположительных проб возможно в следующих случаях:

  1. 1
    Нарушение технологии выполнения, при блокировании комплекса АГ-АТ.
  2. 2
    Наличие у больного аутоиммунных заболеваний (ревматоидный артирит, ревматизм, склеродермия, системная красная волчанка, саркоидоз и др.).
  3. 3
    Злокачественные новообразования.
  4. 4
    Вирусные и бактериальные инфекции.
  5. 5
    Эндокринные заболевания (аутоиммунный тиреоидит, сахарный диабет).
  6. 6
    Беременность.
  7. 7
    Употребление алкоголя.
  8. 8
    Приём жирной пищи.
  9. 9
    Старческий возраст.

Как видно из списка, существует достаточно причин для неверного результата. Поэтому к нему следует весьма настороженно относиться. Рассмотрим наряду с РСК ещё две пробы. Это реакция микропреципитации и VDLR (ее модификация).

Это проба, основанная на способности комплемента связываться с комплексами АГ-АТ. Идентифицируют образовавшийся комплекс с помощью гемолитической системы. Кардиолипиновый антиген заметно повышает чувствительность пробы.

Чувствительной является и реакция Колмера, которая заключается в выполнении при различных температурных режимах. Так, первая фаза реакции Колмера протекает при температуре 20˚С в течение получаса, вторая фаза при тепературе 4-8˚С на протяжении 20-ти часов. За это время происходит связывание комплемента.

При выполнении РСК возможно получение резко положительных результатов. Причиной, вероятно, является большой титр антител в неразведенной сыворотке. В этом случае пробы ставят с уменьшающими дозами.

Для дифференцировки стадий сифилиса и оценки эффективности противосифилитического лечения определяют количество АТ в сыворотке.

Что такое кровь на рпга

Позитивность пробы оценивают с помощью крестов, также в реакциях Вассермана, Колмера и Канна указывается разведение сыворотки.

Так как трудоёмкость выполнения вышеуказанных проб велика, то для широты обхвата диспансеризацией разных групп населения разработан ускоренный способ серодиагностики сифилиса, так называемый экспресс-метод – реакция микропреципитации (сокращенно МР, РМП).

Она выполняется с кардиолипиновым антигеном и вспомогательными веществами. Его преимуществом является забор периферической крови для исследования. Это значительно ускоряет и саму методику, и работу лаборантов.

Рисунок 2 – Реакция микропреципитации (схема)

Для проведения МР необходимы плазма или инактивированная сыворотка крови пациента (именно они содержат антитела). Далее плазму помещают в маркированные лунки. Затем, к исследуемому материалу добавляют каплю кардиолипинового антигена, смешивают и встряхивают. В итоге в сыворотке инфицированного появляются характерные хлопья, разные по степени интенсивности.

Это качественная проба. При количественной оценке используются 10 разведений сыворотки, помещаемой в 10 лунок с соответствующей маркировкой. При качественной МР ответ указывается в виде крестов (плюсов) или минуса, при количественной указывается титр антител (1:2, 1:4 и так далее).

Наличие хлопьев расценивается как положительный или слабоположительный ответ. Возможно появление флокулята и при отсутствии заболевания, поэтому окончательную оценку полученного результата проводят после контрольного исследования или проведения других реакций (РИБТ, РИФ, ИФА, РПГА).

Реакция Вассермана – это первый нетрепонемный тест для определения наличия в крови больных инфекции в виде сифилис и назначения лечения. Данная реакция была впервые предложена ещё в  1906 году учёными Вассерманом, Бруком и Нейсером.  Именно на основе проведения анализа начали впервые выставлять сифилис, назначать терапию, определять эффективность проводимого лечения у человека.

Что такое кровь на рпга

Однако теперь этот тест относят к устаревшим, и стараются применять его как можно реже.

Дело в том, что реакция Вассермана  — это тест, интерпретируемый субъективно, достаточно длительно выполняемый и дорогой. Реакция Вассермана часто способна давать не только верный результат, например, быть отрицательным, если сифилиса нет, но  также она может быть и ложная положительная. К тому же этот тест не подлежит автоматизации и стандартизации.

Таким образом, реакция Вассерамана теперь, как достоверный анализ крови на сифилис, не используется.

К диагностически значимым и применяемым нетрепонемным тестам на сифилис теперь относят РМП.

Нетрепонемные тесты применяют в качественном варианте и и количественном. Качественная реакция позволяет определить в крови наличие антител, а количественная реакция  основана на двукратном разведении крови пациента.

Положительная реакция при нетрепонемных тестах выявляется уже после 2-4 недель развития твёрдого шанкра. После адекватной терапии наблюдается медленное снижение титров антител и постепенно анализ на их позитивность становится отрицательным.

Также результат лечения основывается на определении снижения титра антител именно в 4 раза на протяжении 1 года после его проведения. Если наблюдается такая картина, то это указывает на успешно проведенное лечение.

Если же титры антител не снижаются, то, речь идёт о проявлении возможной серологической резистентности.

Как видно эти тесты применяют для выявления адекватности лечения. Они выполняются для подтверждения излеченности больных.

Однако, нетрепонемный анализ крови на сифилис не стоит относить к строго специфичным, так как титр антител может повышаться и при инфаркте миокарда, онкологических болезнях, пневмонии, заболеваниях почек и печени, ревматизме и многих других даже физиологических состояниях, как, например, при менструации и беременности.

Поэтому, если после проведения, нетрепонемный тест и полученная реакция оказывается положительная, рекомендуется проводить дополнительные трепонемные исследования, в которых можно определить антиген возбудителя такого заболевания, как сифилис. То есть полученная положительная реакция при этих тестах указывает на то, что стоит ставить трепонемные и искать антиген.

“Золотой стандарт” или самый достоверный анализ крови на сифилис – это постановка РИФ или реакция иммунофлюоресценции. В основе данного исследования на предмет наличия инфекции у пациента лежит выявление в его крови комплекса антиген-антитело. Данный тест является чувствительным не только при первичном и вторичном сифилисе, но также и позднем его течении и, что не менее важно, даже на стадии инкубационного периода.

РПГА или реакция пассивной гемагглютинации может быть применена для скрининга и подтверждения диагноза. Положительная реакция основывается на определении гемолиза эритроцитов. Положительная реакция гемолиза происходит в результате взаимодействия антител сыворотки, полученной от больных, с антигенами возбудителя болезни сифилис.

РИБТ или реакция иммобилизации в настоящее время малопригодна для выявления именно ранних стадий болезни, к тому же данный тест дорогой и сложный для постановки.

Выполнение ИФА или иммуноферментного анализа также, как и проведение гемолиза эритроцитов при РПГА, стоит относить к скрининговым методам диагностики.

Что такое кровь на рпга

Такой анализ крови на сифилис, как иммуноблоттинг, характеризуется высокой специфичностью и чувствительностью в случаях диагностики патологии сифилис. Он прост в исполнении, легко интерпретируется и теперь всё чаще рекомендуется отдавать предпочтение данному способу диагностики.

В чём суть непрямых методов диагностики?

Эти способы диагностики сифилиса основываются на непосредственном нахождении возбудителя treponema pallidum в полученном материале от больного человека. Чаще применяют метод темнопольной микроскопии. Материалом для исследования и выявления инфекции служат отделяемое с язвы, с области папулы, а также с бляшки с эрозированной поверхностью.

Для выполнения исследования прямой иммунофлюоресценции на полученный материал наносят некоторое количество меченых противотрепонемных антител, которые способны формировать комплекс “антиген-антитело”, что также указывает на наличие данной патологии у человека. Этот способ применяют при сомнениях  в проведении исследования с материалом, взятым из полости рта либо из прямой кишки.

ПЦР также применяется при исследовании крови, спинномозговой жидкости, сифилидов на предмет наличия заболевания сифилис у больных. И стоит отметить, что при первичном сифилисе результат при наличии болезни составляет от 94%, а при вторичном – от 80%.

В случаях проникновения возбудителя такой болезни, как сифилис, в организм человека в его  крови начинается активный синтез антител, которые формируются в ответ на антиген инфекции. И анализ крови на сифилис и основывается на выявлении этих комплексов антиген-антитело.

Первоначально организм синтезирует такой вид антител, как иммуноглобулины M. Они начинают появляться в крови больных через  10-14 дней после заражения. Их максимальный уровень достигается примерно спустя 6 — 9 недель. И именно в этот период количество этих антител максимально, реакция на сифилис всегда положительная и клиника заболевания наиболее яркая.

Появление антител в виде иммуноглобулинов класса G в крови начинается примерно с конца 4 недели инфицирования. Максимально высокая их концентрация наблюдается в течение следующих 2 лет, но после начинает постепенно снижаться.

Иммуноглобулины класса M помогает выявить такой тест, как реакция иммунофлюоресценции, ИФА и иммуноблоттинг.

Определение иммуноглобулинов G выявляют в случаях проведения РПГА, ИФА, РИФ, а также РИБТ.

Предлагаем ознакомиться:  Перекрут яичка - симптомы болезни, профилактика и лечение Перекрут яичка, причины заболевания и его диагностика на EUROLAB
Ссылка на основную публикацию
Adblock detector